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Antennule attaccate alla faccia ventrale del capo - Antennule delle femmine corte e spesso rudimentali - Ramo dorsale dell'antenna diviso in 4 branche, ramo ventrale diviso in 3 branche - Formula delle setae 0013/133 - 5 paia di appendici di cui le prime 2 prensili e prive di lamelle branchiali. Il quinto paio munito di un grosso uncino ricurvo. Intestino con due ciechi epatici. Occhio lar- go, ocello piccolo o rudimentale, raramente assente.

- Rostro presente - Sinus cervicale assente - Cresta sulla parte dorsale del capo - Valve reticolate, a disegno romboidale, con spina termina- le - Forma ovale od ellittica; rostro marcato nelle femmine ed assente nei maschi, muniti invece di antennule sviluppate. - Post-addome munito di pettine o dentato.

Post-addome munito di due pettini ben distinti, di cui quello distale è munito di più di 12 denti - Fornice e fornice secondario ben sviluppati - Forma ovale e corpo spesso; lunghezza fino a 5 mrn la fem- mina e 2 mm o pocO pin il maschio. Efippio con due uova poste trasversalmente.

- Fornice secondario rudimentale o molto piccolo - Denti del pettine distale normalmente meno di 10 - Ocello presente ed antennule molto piccole - Corpo tozzo e robusto generalmente non trasparente. Lun- ghezza della femmina circa 2,5 mm. Efippio con due uova po- ste verticalmente.

Daphnia pulex include un gran numero di varieta, molte delle quali sono considerate come specie a sé, anche se spes- so si pende a considerare come pulex tutti gli appertenenti al genere Daphnia, dotati di corpo tozzo e non trasparente, e con il pettine munito di uncini.

Il dimorfismo sessuale in Daphnia· magna è molto accen- tuato. Le femmine ed i maschi adulti differiscono fra loro per molti caratteri, che vengono acquisiti nel corso dello sviluppo post-embrionale durante le prime 4 mute. I princi- pali sono: Femmine: maggiore taglia corporea (4 mrn di lunghezza); - corpo arrotondato con rostro ben marcato; - antennule molto piccole poste dietro i l rostro; - margini ventrali del carapace ovali, regolari e rav- vicinati tra loro; margine dorsale del post-addome con profonda inse- natura dietro l'ano che divide la doppia fila di 13-17 denti anali in due parti: una anale vera e propria (9-11 denti) ed una post-anale (4-6 denti).

'Maschi:' minore taglia corporea (2-3 mrn di lunghezza); - capo di forma diversa con occhio più grande e sporgente; - assenza del rostro; - antennule grandi e mobili, terminanti con un lungo flagello piumoso; - margini ventrali del carapace appiattiti, ricoperti da una fitta massa di lunghe setole, e divaricati in modo da lasciar sporgere il primo paio di piedi toracici muniti di uncini e flagelli.

2. CONDIZIONI D'ALLEVANENTO 2.1. Temperatura ed illuminazione: l'allevamento è sta- to condotto ad una temperatura di 21° C; il foto- periodo è stato di 12 ore. 2.2. Camere d'allevamento: per l'allevamento sono sta- te utilizzate delle vasche in vetro tipo acquario, delle dimensioni di 30x50x30 cm, con pareti spesse circa 5 mm. I 45 litri di volume sono stati normal- mente sfruttati per i 3/4. Per contenere individui selezionati, di età compresa fra 1-8 giorni, sono state utilizzate invece delle vasche più piccole, di dimensioni 20x30x15. Per la riproduzione controllata vengono utiliz- zate le apposite camere a forma di imbuto (pag. 14) o dei grossi recipienti cilindrici tipo cristallizza- tori da 3-5 l, sempre in vetro. Allo scopo di non scon- volgere il delicato equilibrio creatosi in ognuna delle vasche, queste sono state svuotate e pulite il meno possibile, cioè solamente quando alcuni microrganismi, quali funghi ed alghe, vi si sono depositati aderendo alle pareti. Inoltre sono state lavate con acido ogni 6 mesi, per eliminare i depositi di calcio e i detriti sul fondo.

2.3. L'acqua: L'acqua deve essere libera da cloro addizionato; a questo scopo è sufficiente utilizzarla 24 o 48 ore dopo la raccolta. Le camere d'allevamento non richiedono un ricambio to- tale e costante dell'acqua. E' infatti sufficiente limitarsi ad aggiungere alle vasche quella parte di acqua evaporata. L'areazione dell'acqua mediante aeratori da acquario non è indispensabile per il buon andamento dell'allevamento, ma può comunque dimostrarsi utile, sia per annullare eventua- li effetti tossici da parte della co2 liberata dai fermenti utilizzati come nutrimento, sia per rimuovere meccanicamente lo strato superficiale di polvere e microrganismi.

2.4. L'alimentazione: In base alle prove effettuate è risultato che un tipo di alimentazione mista, ottenuto integrando quella primaria a base di lievito con una accessoria costituita da alghe mo- nocellulari, dà i migliori risultati. Infatti lievito ed al- ghe sia usati separatamente·· s·ia combinati, si sono dimostra- ti superiori a tutti gli altri tipi di alimentaziÒne studia- ti per gli allevamenti di Daphnia riportati in letteratura. Soprattutto la combinazione dei due alimenti ha portato ad un forte aumento della produzione di prole rispetto a quella riscontrata nelle colture ad alimentazione singola. Il lievito è del tipo comunemente usato per cucina, co- stituito da fermenti vivi, in vendita sfuso od in confezioni pronte. L'uso delle confezioni già pronte evita l'inquinamen- to da parte di muffe, cosa assai frequente in quello sfuso quando la conservazione superi i pochi giorni. La sospensione nutritiva viene preparata alla concentrazione dell'1% in acqua distillatai essa può essere conservata alla temperatura di +5~ C per circa una settimana. Alla conta delle cellule una sqpensione di questo tipo con- tiene circa 801×10 cellu.le/cc e viene distribuita nelle vasche in quantità di 1 ml per ogni litro d'acqua. Questo dato è però solamente indicativo in quanto è necessario tenere conto delle dimensioni delle vasche e del- la densità della popolazione di Daphnia nelle stesse. Infatti mentre in una vasca grande (20-40 l) e con un' ampia superficie è sempre possibile introdurre la relativa quantità di lievito, in un recipiente molto piccolo o dalla ridotta superficie si possono avere dei fenomeni tossici le- gati alla co liberata dalla cellule in fermentazione. Inoltre quando la popolazione è in fase dì crescita ed il rap- porto acqua/N. dafnìe è ancora basso, sarà bene immettere un quantitativo inferiore alla dose normale. A questo proposito è comunque consigliabile di controllare, prima di ogni ulte- riore distribuzione, che l'acqua delle vasche sia perfetta- mente limpida, cioè che le dafnie abbiamo utilizzato tutto il lievito a disposizione. L'acqua torbida indica infatti la _presenza residua dì cellule dei fermenti. Quando invece la densità delle dafnìe è elevata si può superare il limite di 1 ml/1, soprattuto nelle vasche di media e grande superficie. Riguardo all'alimentazione dei nauplì è consigliabile una dieta primaria“a base dì alghe, integrata con basse dosi di lievito o, nel caso non si disponesse dì alghe, l'alimen- tazione con solo lievito aumentando gradatamente la dose fi- no a raggiungere il ml/1 al 4°-5° giorno, in quanto i naupli sono molto più sensibili degli adulti agli effetti tossici della co2 Per quanto riguarda le alghe in letteratura sono ripor- tati molti dati circa l'utilizzazione come fonte di alimen- tazione per Daphnia dei generi Chlorella, Scenedesmus e Selenastrum (Watanabe, 1955; Sasa, 1960; Ten Berge, 1978). Le alghe vanno preparate settimanalmente ed utilizzate dopo il 10° giorno, cioè dopo il raggiungimento della densi- tà ottimale {25° C, fotoperiodo n. 12 ore). Al momento della preparazione la sospensione è di un colore verde molto tenue, che scurisce gradatamente col pas- sare dei giorni. 'In seguito tende ad ingiallire e se ne scon- siglia l'uso, in quanto potrebbe dare luogo ad effetti tos- sici.'

- Controllo della densità delle dafnie nelle vasche, con even- tuale ridistribuzione degli organismi; Misurazione del PH; Rimozione per agitazione o prelievo superficiale dell'even- tuale pellicola presente sulla superficie dell'acqua; -Eventuale aggiunta d'acqua nelle vasche; - Distribuzione del nutrimento; - Eventuale preparazione del lievito e/o delle alghe.

Oltre alle vasche di dimensioni maggiori, necessarie per l'allevamento vero e proprio dove coesistono crostacei di tutte le taglie ed età, è necessario avere a disposizio- ne una serie di vasche più piccole contenenti individui di eta-cònosciuta e taglia uniforme, da usare per le eventuali prove tossicologiche. A questo scopo bisogna raccogliere gironalmente una quantità appropriata di naupli e parli in una o più vaschette numerate. Nel giro di 8 giorni si avran- no una serie di vasche contenenti individui separati, che vanno da quelli di 12 ore agli adulti pronti per la ripro- duzione. Parte di questi ultimi verranno utilizzati per la riproduzione di altri naupli, secondo le seguenti modalità: il richiesto numero di adulti, nell'interno dei quali siano già visibili gli embrioni dei futuri naupli, viene posto dentro cristallizatori da 2-4 litri, in modo da ottenere un rapporto acqua/N. dafnie di 100 cc/1, ed alimentati con il

lievito. Dopo 24 o 48 ore sarà possibile raccogliere i nuovi naupli mediante filtrazione dell'acqua. A questo proposito sono riportate le dimensioni dei filtri più comunemente usa- ti per D. magna, in materiale plastico a maglia quadrata, in- dicando in micron il lato delle singole maglie: 800 ù trattiene solo gli adulti di oltre 2 settimane 650 ù trattiene tutti gli adulti 520 ù lascia passare i naupli fino a 2-3 giorni 420 ù lascia passare solamente i naupli di 12-24 ore 200 ù trattiene tutte le dafnie lasciando passare l'acqua con i sedimenti presenti.